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Por que a cultura celular lisa os glóbulos vermelhos primeiro?

2022-12-23

Introdução básica
O lisado de eritrócitos é um dos métodos mais simples e fáceis de remover glóbulos vermelhos, ou seja, dividir os glóbulos vermelhos com lisado, que não danifica as células nucleadas e pode remover completamente os glóbulos vermelhos. A clivagem do lisado é um método suave de remoção de glóbulos vermelhos, usado principalmente para a separação e purificação de células de tecido dispersas por digestão enzimática, separação e purificação de linfócitos e remoção de glóbulos vermelhos em experimentos de proteína tecidual e nucléica extração ácida. As células de tecido obtidas pelo lisado de glóbulos vermelhos não contêm glóbulos vermelhos e podem ser posteriormente utilizadas para cultura primária, fusão celular, citometria de fluxo, separação e extração de ácido nucleico e proteína, etc.

Instruções de uso
Amostra de células de tecido
1. Tecidos frescos foram digeridos por pâncreas/enzima ou colagenase e dispersos em suspensão de célula única, e o sobrenadante foi descartado por centrifugação.

2. Retire o lisado de ELS do refrigerador a 4ºC, adicione o lisado de ELS ao precipitado celular em uma proporção de 1:3-5 (adicione 3-5ml de lisado a 1ml de célula compactada), sopre suavemente e misture.

3. Centrifugue a 800-1000rpm por 5-8 minutos e descarte o líquido transparente vermelho superior.

4. A parte precipitada foi coletada e centrifugada com solução de Hank ou solução de cultura isenta de soro por 2-3 vezes.

5, se a trinca não estiver completa/completa pode-se repetir os passos 2 e 3.

6. Células de ressuspensão para experimentos subsequentes; Se o RNA for extraído, é melhor fazê-lo na solução preparada na Etapa 4 usando água DEPC

Os glóbulos vermelhos têm um ciclo de vida muito curto, apenas 120 dias, mas reproduzem o sangue muito rapidamente e, neste caso, são particularmente capazes de divisão celular e são as células que se dividem mais rapidamente, por isso esta célula é muito valiosa, por isso é muito útil para a cultura de células. É muito simples, não contém organelas, apenas membranas celulares e proteínas.

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