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Quais são as funções do kit ELISA?
2022-12-23
O kit ELISA é baseado na fase sólida do antígeno ou anticorpo e na marcação enzimática do antígeno ou anticorpo. O antígeno ou anticorpo ligado à superfície do veículo sólido ainda retém sua atividade imunológica, e o antígeno ou anticorpo marcado com enzima retém tanto sua atividade imunológica quanto a atividade enzimática. No momento da determinação, a amostra em teste (na qual o anticorpo ou antígeno é medido) reage com o antígeno ou anticorpo na superfície do transportador sólido. O complexo antígeno-anticorpo formado no transportador sólido é separado de outras substâncias no líquido por lavagem.
Antígenos ou anticorpos marcados com enzimas são adicionados, que também se ligam ao transportador sólido por reação. Neste momento, a quantidade de enzima na fase sólida é proporcional à quantidade de substância na amostra. Depois de adicionar o substrato da reação enzimática, o substrato é catalisado pela enzima para se tornar produtos coloridos. A quantidade do produto está diretamente relacionada com a quantidade da substância testada no corpo de prova, portanto, análises qualitativas ou quantitativas podem ser feitas de acordo com a profundidade da cor.
A alta eficiência catalítica das enzimas amplifica indiretamente os resultados da resposta imune, tornando o ensaio altamente sensível. ELISA pode ser usado para determinar antígenos, mas também pode ser usado para determinar anticorpos.
Princípios básicos do kit ELISA
Ele usa reação específica de antígeno e anticorpo para conectar o objeto à enzima e, em seguida, produz uma reação colorida entre a enzima e o substrato para determinação quantitativa. O objeto de medição pode ser anticorpo ou antígeno.
Existem três reagentes necessários neste método de determinação:
â Antígeno ou anticorpo de fase sólida (adsorvente imune)
â¡ Antígeno ou anticorpo marcado com enzima (marcador)
⢠substrato para a ação enzimática (agente de desenvolvimento de cor)
Na medição, o antígeno (anticorpo) é primeiro ligado ao carreador sólido, mas ainda retém sua atividade imunológica e, em seguida, é adicionado um conjugado (marcador) de anticorpo (antígeno) e enzima, que ainda retém sua atividade imunológica e enzima originais atividade. Quando o conjugado reage com o antígeno (anticorpo) no suporte sólido, o substrato correspondente da enzima é adicionado. Ou seja, hidrólise catalítica ou reação REDOX e cor.
Antígenos ou anticorpos marcados com enzimas são adicionados, que também se ligam ao transportador sólido por reação. Neste momento, a quantidade de enzima na fase sólida é proporcional à quantidade de substância na amostra. Depois de adicionar o substrato da reação enzimática, o substrato é catalisado pela enzima para se tornar produtos coloridos. A quantidade do produto está diretamente relacionada com a quantidade da substância testada no corpo de prova, portanto, análises qualitativas ou quantitativas podem ser feitas de acordo com a profundidade da cor.
A alta eficiência catalítica das enzimas amplifica indiretamente os resultados da resposta imune, tornando o ensaio altamente sensível. ELISA pode ser usado para determinar antígenos, mas também pode ser usado para determinar anticorpos.
Princípios básicos do kit ELISA
Ele usa reação específica de antígeno e anticorpo para conectar o objeto à enzima e, em seguida, produz uma reação colorida entre a enzima e o substrato para determinação quantitativa. O objeto de medição pode ser anticorpo ou antígeno.
Existem três reagentes necessários neste método de determinação:
â Antígeno ou anticorpo de fase sólida (adsorvente imune)
â¡ Antígeno ou anticorpo marcado com enzima (marcador)
⢠substrato para a ação enzimática (agente de desenvolvimento de cor)
Na medição, o antígeno (anticorpo) é primeiro ligado ao carreador sólido, mas ainda retém sua atividade imunológica e, em seguida, é adicionado um conjugado (marcador) de anticorpo (antígeno) e enzima, que ainda retém sua atividade imunológica e enzima originais atividade. Quando o conjugado reage com o antígeno (anticorpo) no suporte sólido, o substrato correspondente da enzima é adicionado. Ou seja, hidrólise catalítica ou reação REDOX e cor.
A tonalidade de cor que produz é proporcional à quantidade de antígeno (anticorpo) a ser medido. Este produto colorido pode ser observado a olho nu, microscópio óptico, microscópio eletrônico, também pode ser medido por espectrofotômetro (instrumento de marcação de enzimas). O método é simples, conveniente, rápido e específico.
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