Escolher o material de cultura certo é crucial para garantir o crescimento celular ideal e resultados experimentais. Ao escolher vasos de cultura celular, é importante considerar fatores como o tipo de célula, a finalidade específica da sua cultura, a escala da cultura, o tipo de meio de cultura, os materiais e tamanho dos vasos, tratamentos de superfície, tampas adequadas troca gasosa e sua compatibilidade com o equipamento do seu laboratório.
Aqui estão os principais fatores a serem considerados ao selecionar o recipiente de cultura celular certo
1. Escolha o recipiente de cultura celular com base no tipo de células
Células Aderentes
Essas células precisam de uma superfície para se fixarem e se espalharem. Para células aderentes, você precisará de vasos com uma área de superfície que forneça espaço suficiente para fixação e crescimento celular.
Exemplos Frascos tratados com cultura de tecidos, placas de Petri e placas de múltiplos poços.
Células de Suspensão
Estas células crescem flutuando no meio, portanto uma superfície não é considerada.
2. Escolha o recipiente de cultura celular com base no tamanho (capacidade de volume)
Culturas de pequena escala
Para experimentos em pequena escala ou triagem de alto rendimento, vasos menores são ideais.
Exemplos Placas de múltiplos poços (placas de cultura de 6, 24, 96 células),
Placas de Petri, ou frascos T25.
Culturas em Grande Escala
Se você precisar cultivar grandes quantidades de células, vasos maiores ou biorreatores são melhores.
Exemplos Frascos de cultura de células T75 e T175, biorreatores ou frascos giratórios para culturas de células em suspensão.
3. Escolha o recipiente de cultura celular com base no tratamento de superfície
Superfícies tratadas com cultura de tecidos
Os vasos são pré-tratados para promover a fixação celular, tornando-os adequados para tipos de células aderentes. Geralmente são revestidos com substâncias como colágeno, fibronectina ou outros componentes da matriz extracelular.
Superfícies não tratadas
Ideal para culturas em suspensão ou quando as células não precisam aderir à superfície. Eles geralmente são usados para células que crescem livremente no meio.
4. Escolha o recipiente de cultura celular com base no material
Poliestireno comumente usado para aplicações padrão de cultura de células. É claro, permitindo fácil inspeção visual e funciona bem tanto para células aderentes quanto para células em suspensão.
Policarbonato ou Polipropileno são usados para certas aplicações de biorreatores e para vasos que exigem mais flexibilidade ou tratamentos de superfície específicos.
Vidro usado para cultura de tecidos padrão devido ao custo e à quebra, os recipientes de vidro podem ser adequados para aplicações específicas ou culturas em larga escala.
Frascos
Para cultura celular geral, frascos T (T25, T75, T150) são comumente usados. A superfície plana fornece uma boa área para fixação e crescimento celular. Eles podem ser usados tanto para células aderentes quanto para culturas em suspensão, se as condições apropriadas forem mantidas.
Pratos de Petri
Comum para culturas em pequena escala e para experimentos que requerem observação, como ensaios de formação de colônias.
Placas Multi-Poços
Eles são úteis para triagem de alto rendimento e experimentos em menor escala. Placas com 6, 12, 24, 48,
96, ou 384 poços estão disponíveis e são ideais para ensaios baseados em células, liberação de citocinas, testes de drogas e outras aplicações de alto rendimento.
Frascos giratórios
Usado para culturas de células em suspensão, particularmente em volumes maiores onde a agitação controlada é necessária para manter o crescimento celular e evitar a aglomeração de células.
Biorreatores
Para cultura em suspensão em larga escala, os biorreatores permitem um controle mais complexo sobre as condições ambientais (por exemplo, pH, temperatura, oxigenação) e são usados para produção em grande volume, como na fabricação biofarmacêutica.
6. Escolha o recipiente de cultura celular com base na esterilidade e ventilação
Esterilidade
Certifique-se de que o recipiente esteja estéril ou tenha sido esterilizado para evitar contaminação. A maioria dos recipientes de cultura comerciais são pré-esterilizados, mas verifique sempre a embalagem.
Ventilação
Alguns recipientes, como frascos, vêm com tampas ventiladas ou filtros para permitir a troca de ar e, ao mesmo tempo, evitar a contaminação. Isto é essencial quando se cultiva células em condições de alta densidade.
7. Escolha o recipiente de cultura celular com base na conveniência de uso
Autoclavável vs. Descartável
Alguns recipientes de cultura podem ser autoclavados para reutilização (por exemplo, garrafas de vidro, certos frascos de plástico), enquanto outros são descartáveis e descartáveis (por exemplo, placas de Petri de plástico, placas multipoços).
Manuseio e Transporte
Considere a facilidade de transferência de células entre vasos. Por exemplo, placas de múltiplos poços podem exigir placas especializadas para facilitar o manuseio com equipamentos como pipetadores automatizados.
8. Escolha o recipiente de cultura celular com base no volume do meio de cultura
Escolha um recipiente que possa acomodar o volume desejado de meio de cultura sem desperdiçar recursos. Se estiver trabalhando com uma cultura de alto volume, podem ser necessários frascos ou biorreatores maiores, enquanto volumes menores são adequados para placas ou placas de cultura celular.
9. Escolha o recipiente de cultura celular com base em considerações de custo
Descartável vs. Reutilizável
Os recipientes de plástico descartáveis são económicos e reduzem o risco de contaminação, mas podem ser caros para operações em grande escala. Os recipientes de vidro reutilizáveis têm um custo inicial mais elevado, mas podem ser esterilizados e reutilizados várias vezes, tornando-os mais económicos para utilização a longo prazo.
Eficiência de volume
Certifique-se de que o tamanho do recipiente seja apropriado para evitar desperdício de materiais, especialmente ao usar meios de crescimento ou reagentes caros.
10. Escolha o recipiente de cultura celular com base nos requisitos específicos da aplicação
Imagem
Se você precisar visualizar células sob um microscópio, escolha vasos com materiais opticamente claros e dimensões apropriadas para sua configuração de imagem (por exemplo, placas multipoços para triagem de alto conteúdo ou pratos com fundo de vidro para imagens de células vivas).
Agitação Controlada
Para culturas de células em suspensão, considere frascos giratórios ou biorreatores que forneçam agitação controlada para manter as células suspensas uniformemente.
Conclusão
A escolha do recipiente de cultura celular certo requer o equilíbrio de vários fatores, incluindo tipo de célula, escala de cultura, compatibilidade de materiais e necessidades experimentais específicas. As células aderentes exigirão superfícies que promovam a fixação, enquanto as células em suspensão se beneficiam de maiores volumes e agitação. Para trabalhos em pequena escala, placas com múltiplos poços ou frascos T podem ser suficientes, enquanto culturas maiores podem exigir frascos giratórios ou biorreatores. Certifique-se sempre de que os recipientes atendam aos seus requisitos de esterilidade e manuseio e considere a relação custo-benefício com base no seu uso.
Ao considerar esses fatores, você pode selecionar o recipiente ideal que forneça as condições certas para sua cultura celular e objetivos experimentais.