"Como todos sabemos, a PCR é um método experimental básico em laboratórios bioquímicos." Os resultados experimentais são sempre insatisfatórios, o que pode ser devido a uma leve contaminação dos consumíveis plásticos de PCR, ou interferência experimental causada pela introdução de inibidores. Há outra razão muito importante: a seleção inadequada de consumíveis também terá um grande impacto nos resultados experimentais.
Existem muitas razões que afetam os resultados dos experimentos de PCR: geralmente existem os 7 tipos a seguir.
1. Primers: Os primers são a chave para a reação específica da PCR, e a especificidade dos produtos da PCR depende do grau de complementaridade entre os primers e o DNA molde;
2. Enzima e sua concentração;
3. A qualidade e concentração do dNTP;
4. Ácido nucleico modelo (gene alvo);
5. Concentração de Mg2+;
6. Ajuste de temperatura e tempo;
7. Número de ciclos;
8. Equipamentos, consumíveis, etc.
Entre os muitos fatores que influenciam, os consumíveis são um dos fatores muito importantes e facilmente negligenciados.
Existem muitos tipos de
consumíveis de PCR: 8 tubos, tubos de baixo volume, tubos padrão, sem aba, semi-saia, com aba completa e uma série de placas de PCR e qPCR. É muito difícil escolher, e existem muitos problemas comuns, vamos dar uma olhada nos problemas que cada um escolhe
consumíveis de PCR, e como resolvê-los?
Por que são
consumíveis de PCRgeralmente feito de PP?
Resposta: Os consumíveis de PCR/qPCR são geralmente feitos de polipropileno (PP), porque é um material biologicamente inerte, a superfície não é fácil de aderir a biomoléculas e possui boa resistência química e tolerância à temperatura (pode ser autoclavado a 121 graus) bactérias e também pode suportar mudanças de temperatura durante o ciclo térmico). Esses materiais geralmente estão em contato direto com reagentes ou amostras, portanto, materiais de alta qualidade e boas técnicas de processamento precisam ser selecionados durante o processo de produção e preparação.